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¿Qué es la “inmunoglobulina no inmunitaria”?

¿Qué es la “inmunoglobulina no inmunitaria”?


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De una breve introducción a los controles de inmunohistoquímica:

Control de isotipos

Este control se puede utilizar cuando se trabaja con anticuerpos primarios monoclonales. La muestra se incuba con diluyente de anticuerpos, complementado con un inmunoglobulina no inmune del mismo isotipo (por ejemplo, IgG1, IgG2A, IgG2B, IgM) y concentración que el anticuerpo monoclonal primario. Luego, la muestra se incuba con el anticuerpo secundario y los reactivos de detección. Estos pasos ayudarán a garantizar que lo que parece ser una tinción específica no fue causado por interacciones no específicas de moléculas de inmunoglobulina con la muestra. La tinción de fondo debe ser insignificante y no parecerse a una tinción específica.

Busqué en Google y descubrí que algunos agentes patológicos pueden unirse a las inmunoglobulinas de una manera no inmune, es decir, uniéndose a sus regiones Fc. Pero eso todavía me deja en la oscuridad sobre los "IG no inmunes".

¿Quizás es un IG con el que el anticuerpo secundario no se unirá?

¿O tal vez es un IG que no tiene actividad contra el antígeno diana?


El término "inmunoglobulina no inmune"es confuso y no estándar en el campo de la inmunología -"preinmune"a veces se usa, pero no siempre es exacto. Un control negativo es como lo describen: los mismos diluyentes y componentes de la muestra incubados con el anticuerpo de interés, solo que usan un anticuerpo no específico del mismo isotipo que es no se espera que se vincule a cualquier destino en un "inmunodependiente"manera": la forma "habitual" en la que piensa que un anticuerpo se une a un antígeno diana. Sin embargo, los anticuerpos pueden unirse a las muestras de una manera inmunodependiente, a través de interacciones proteína-proteína (la muestra no se bloqueó lo suficiente) o a los receptores Fc, por ejemplo.

El anticuerpo no específico puede provenir de varias fuentes: una hemorragia previa a la inmunización del animal que generó un anticuerpo primario policlonal, un anticuerpo contra un objetivo que no se espera que esté presente en la muestra, como KLH o GFP, o un anticuerpo monoclonal. diseñado o proyectado para no adherirse a nada.


En teoría, los "anticuerpos no inmunes" son cualquier tipo de anticuerpos que no se unen a la muestra utilizando sus Fab, regiones específicas. Consulte, por ejemplo, https://books.google.com/books?id=sFMJAwAAQBAJ&lpg=PA80&ots=O9CqXW9kYt&pg=PA80#v=onepage&f=false Aquí, se hace una afirmación de que aún pueden vincularse de forma no específica utilizando sus regiones Fc.

En la práctica, se termina utilizando una mezcla genérica de todas las inmunoglobinas de la sangre de una especie (aquí, todas "todas las inmunoglobinas de un isotipo específico"). Es prohibitivamente caro agotar esta mezcla de anticuerpos específicos para todas las proteínas de su muestra. También podría imaginarse una desnaturalización que deja inactivas las regiones Fc. No pude encontrar evidencia de ninguno, tan genérico es la mezcla. Consulte http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1162460/pdf/biochemj00424-0223.pdf para ver un ejemplo de preparación "no inmune": es simplemente una precipitación de todas las IgG. Sería genial si pudiera probar que la mezcla genérica tiene muy pocos o ningún anticuerpo específico para sus muestras *, pero dudo que alguien se moleste.

Otra opción es un Ab monoclonal que actúa contra una proteína completamente no relacionada. Una vez más, se debe probar que no existe una reactividad específica * con las muestras.

Pro-tip: la búsqueda de "IgG no inmune" traerá muchos más resultados que la "inmunoglobulina no inmune". En general, "inmunoglobulina" se usa menos que el sinónimo "anticuerpo".

* Esto significa escindir las regiones Fc, separarlas, etiquetarlas con radiactividad o fluorescencia y probarlas en una muestra. Es tedioso y caro.


Ver el vídeo: Inmunoglobulinas D (Diciembre 2022).